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一秒记住【xiaoyanwenxue.com】精彩无弹窗免费!在其他课题组蹭实验的时候,惯例都是由对方课题组的学生来进行实验操作,主要是为了避免可能出现的实验事故。
实验室安全非常重要,像这种跨学校做实验,不出事倒还好,一旦出了事故处理起来非常麻烦,甚至会波及到院系、学校层面。
因此,虽然许秋已经复制了孙文晏的技能,trpl,五阶10熟练度,但还是和韩嘉莹一同在旁边围观。
孙文晏则一边在实验台前进行实验操作,一边进行讲解。
和普通荧光光谱pl测试类似,在测试瞬态荧光光谱trpl前也要先测试光吸收uv-vis光谱,确定激发光的波长。
用于trpl的激光器是单色脉冲激光器,因为信号的响应级别在几纳米甚至100皮秒级别,所以激光器也至少要在几纳米甚至100皮秒级别,故而价格比较贵,单个均价在万元到十万元左右。
侯凯华实验室里一共有三种波长的激光器,分别为425、565和710纳米,可以适用于大多数的实验情况。
孙文晏先通过uv-vis光谱结果,确定使用710纳米的激光器激发,然后又测试了一下稳态pl,确认样品荧光信号的大致强度。
做好前期准备工作后,开始trpl测试。
孙文晏将样品放在trpl测试舱内的卡槽中,这个卡槽是上下压片式的,长条状的,可以把样品固定在上面。
这也是他们要求许秋准备1厘米乘4厘米规格基片的原因。
随后,孙文晏关闭样品舱,打开激光器、打开检测器、操作电脑软件,开始调光。
“信号检测器非常灵敏,单位时间内通过它的光子数量不能太多,这边这个示数是强度的百分比,一般测试前保持在2-4左右,测试效果最好,开始的时候,要用减光倍率比较高的减光镜,然后慢慢的降低减光倍率,让强度值处于2-4之间。”孙文晏介绍道。
许秋了然,超过4应该会对检测器造成损伤?而低于2?则样品信号强度过低,信噪比低?数据不容易处理。
“减光镜?是不是类似于相机上的nd镜?”韩嘉莹好奇道,之前她对单反比较感兴趣?买了一整套设备,不过这些设备被她玩了几个月就丢在角落里吃灰了。
“对的?用的是同一种东西?学名应该叫中灰密度镜。”孙文晏点点头,继续道:
“现在的信号强度是032,我们只要去掉一个10倍减光镜即可,虽然我们用的减光镜和nd镜功能类似?但对减光倍率的表示方法不同。
nd镜中?nd2表示减光50,nd4表示减光75,nd8则是875,换算起来比较麻烦,我们的则直接分为减光2倍、10倍、100倍、1000倍这几个档位?比较方便测试。”
说完,孙文晏按了几个键后?打开样品舱,去掉一个减光镜?然后关闭样品舱,又按了几个键?整个过程非常熟练。
韩嘉莹看的眼花缭乱?摸不着头脑?只注意到屏幕上样品信号的强度,现在处于300-320之间,不断波动。
许秋则看明白了,孙文晏的操作顺序是关闭检测器,关闭激光器,打开样品舱,去掉减光镜,关闭样品舱,开启激光器,开启检测器。
‘关闭检测器是因为自然光、灯光的强度就足以对检测器造成损伤。’
‘关闭激光器,是怕激光器对实验人员眼睛造成损伤,当然目前这台激光器的功率不足以造成这样的结果,但光学实验的规矩就是这样的。’
‘这种精密光学仪器,测试起来就是麻烦啊,而且自动化程度也不高,在实验室测试pl时,把样品放进去,设置好参数,点击开始,就可以等待结果出来。’许秋内心吐槽了一会儿,继续围观实验。
trpl测试软件中可供设置的参数不多,大多数使用默认参数即可,不需要修改,只有一个比较重要的参数,那便是时间尺度。
孙文晏不清楚样品的性质,便选择了一个比较保守的参数,100纳秒,适用于大多数测试情况。
设置好参数,启动测试。
仪器开始“当当”作响,电脑屏幕上显示着实时变化的图像。
一个个数据点从横轴位置,不断往纵轴的正方向,向上移动。
两分多钟后,图像停止变化,此时最大信号强度是10000。
得到的图像不是一条曲线,而是有着一堆数据点的散点图。
因为数据点非常多非常密,可以明显看出趋势,从原点开始信号强度迅速提高至10000,随后又缓慢下降至100左右。
看到实验结果,孙文晏笑着说道:“测的还算顺利,基线信号在100左右,信噪比不高,这个100纳米的数据可以直接使用,看来你们样品的荧光寿命不算太短。”
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